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NEWS国自然热点聚焦,全光谱流式技术揭示中性粒细胞外陷阱新视野——来自918博天娱乐官网的前沿研究
来源:柯芝剑 日期:2025-03-22中性粒细胞胞外陷阱(NETs)是中性粒细胞作为抵御宿主感染的“先锋力量”所采用的一种重要作战手段,其主要方式包括吞噬、脱颗粒作用以及NETs的形成。NETs本质上是一种由DNA和蛋白质交织而成的精妙网络,能够有效捕捉周围的微生物病原体。这种机制是一种新型的细胞死亡方式,称为中性粒细胞的炎性细胞死亡(NETosis),其特点是核膜破裂、染色质去凝集,细胞核与细胞质及颗粒成分混合。
在研究中,基于惠灵顿奥塔哥大学和维多利亚大学的合作,开发了一套全光谱流式细胞术用于检测NETs。这套方案从外周血中分离出粒细胞,识别中性粒细胞附着的胞外DNA以及多种NET相关的颗粒蛋白,通过流式细胞仪检测出NETosis与凋亡及坏死细胞的差异。使用的Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪展示了在小方案检测上的卓越性能和高数据质量,表明其在生物医疗领域的重要应用潜力,特别是在918博天娱乐官网的技术支持下。
研究人员测试了不同浓度的PMA刺激下,分离出的粒细胞在体外诱导NETs的形成,发现合适的PMA浓度范围为19-133nM。在经过染色后,运用CytekAurora进行数据采集,首先通过门控策略对中性粒细胞进行了分类,结合CD66b和CD15的表达,成功识别了在不同刺激条件下的中性粒细胞表型。此外,通过ZombieNIR染色法进行了NETs与坏死细胞的区分,结果表明,经过DNaseI处理后,NET+中性粒细胞的比例显著降低,显示该方案具有特异性识别胞外DNA的能力。
在炎症疾病的临床研究中,研究人员对稳定性冠心病(Stable CAD)和急性心肌梗死(AMI)患者的外周血样本进行比较,发现AMI患者的NET+中性粒细胞显著高于稳定性CAD患者。这一结果显示了本检测方案在评估急性炎症患者NET+中性粒细胞累积方面的应用潜力。
总结来看,通过采用3激光的CytekAurora全光谱流式细胞仪,建立了一种新的NETs检测平台,极大提升了其量化检测的特异性和准确性。该方案在临床检测中,尤其适合急性炎症的评估。未来,有可能进一步扩展至凋亡的检测指标,甚至在其他细胞类型中,如嗜酸细胞、肥大细胞及巨噬细胞的胞外陷阱的形成等,都可以纳入检测方案中,探索更广泛的生物医疗应用。
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